受精

试管婴儿中受精是在体外完成的，所以IVF在日本也称为体外受精。

卵子受精后就成为具有生命力的受精卵，通过细胞的快速分裂，开始了胚胎发育过程。

第一步：对取出的卵子进行形态观测 

卵子级别是刚刚取出卵子时从形态上观测的结果，按卵母细胞的外围颗粒膜细胞的丰富程度分为G1到G3。

G1：最佳，卵母细胞外围的颗粒膜细胞非常饱满

G2：其次，卵母细胞外围的颗粒膜细胞较饱满

G3：较差，卵母细胞外围的颗粒膜细胞稀疏，未成熟可能性高

D：变异卵，不能使用

第二步：剥离颗粒膜细胞，判定卵子成熟度

培养的第一步，就是剥离卵子的外部颗粒膜细胞，留下卵母细胞。根据卵母细胞的成熟度，即是否开始减数分裂排出第一极体，分为GV，MI，M2三种：

GV卵：GV期的卵母细胞没有恢复减数分裂，将颗粒膜细胞去掉后可以看到明显的核。自然排卵状态下月经第八天卵子即开始长成到GV期。GV卵在正常IVF培养中不能使用，只能用于四代试管胞浆置换等操作。

MI卵：M1期是第一次减数分裂中期的卵母细胞，没有排出第一极体，颗粒细胞也扩散的不好。

MII卵：M2期卵母细胞是第二次减数分裂中期的卵母细胞，已经排出第一极体。只有M2卵属于成熟卵，可以和精子结合，排出第二极体，成为受精卵。

第三步：选择受精方式，进行受精操作 

根据精子情况不同，我们采用体外受精（自然受精）、显微受精（ICSI）和结合法。

1、自然受精（一代试管）：在日本称为“体外受精”，在卵子周围是精子浓度为10万个/ml的媒精液，精子优胜劣汰自行进入卵子，完成精卵结合的过程。

2、显微受精（二代试管）：在冻精或者鲜精精子状况不好、曾经有过受精障碍、或者精液的观察结果不明显的情况下使用。

显微受精或称注射受精（ICSI, Intra-Cytoplasmic Sperm Injection），俗称二代试管婴儿技术，显微镜下观察精子的活动情况，选择最强壮健康的直接注射到卵子中，进行受精和孵化。

3、结合法是体外受精和显微受精两种方式的结合：把采集到的卵子，一部分进行自然受精，另一部分进行显微受精，或者在自然受精失败时，用显微受精作为补救。

在签署受精卵培养同意书时，患者可以选择自己倾向的受精方式，或选择由培养师决定。

——培养师在进行ICSI显微受精操作

第四步：受精卵分裂和培养 

受精成功的标志：

受精过程约需24小时。

当一个精子进入卵母细胞的透明带时，受精过程即开始。

到卵原核和精原核的染色体融合在一起时，能够看到两个原核（2PN）时，标志着受精过程的顺利完成。

随后受精卵开始快速的倍数分裂，在受精第二天分裂为四细胞，第五天和第六天会继续成长为囊胚。

关于受精环节的常见问题：

Q：我今天取的卵都是G2，为什么还是不受精呢？

A：卵子的级别G2是刚刚取出后从形态上观测的结果，还没有开始培养，还不能真正反应卵子的质量和生长能力。从统计数据看，93%新取出的卵子都是G2，G2卵有75%的概率能被受精。

Q：什么叫做“卵子不成熟，不能受精？”

A：剥离卵子外部颗粒膜细胞后，可以观察到卵子的成熟度。GV和M1都属于卵子不成熟的情况。GV卵不再使用，M1经过培养（即卵子前培养），还有机会长到M2。只有达到M2级的卵，才具备了受精的能力。因为试管婴儿是采用超促排（即比自然状态下多促一些卵），取出的卵平均有1/4是不成熟的，达不到受精要求。

Q：冻精好还是鲜精好呢？

A：因为精子冷冻技术已非常完善，冻精和鲜精的培养结果差别极小，我们一般建议两者皆可以，有条件的情况下优先使用鲜精。

Q：自然受精好还是显微受精好呢？

A：临床统计看，自然受精比显微受精的胚胎后期的流产率略低，但差别不明显，所以根据精子的情况，我们会优先使用自然受精。只有在使用冻精，或者鲜精精子状况不好、曾经有过受精障碍、或者精液的观察结果不明显的情况下使用显微受精。

Q：什么叫做 “卵子受精后不分裂” ？

A：在自然受精或显微受精情况下，最健壮的精子会自行进入或被注射到卵子中。正常情况下卵在受精后会开始裂变，首先分裂成两个原核。如果没有开始分裂，只有物理注入，受精卵就没有在继续生长，这种叫“受精卵不分裂”。

Q：什么叫做“受精卵异常分裂，单核或三核” ？

A：正常卵子受精后，在分裂初期会形成两个原核。如果出现单核1PN或者三核3PN，都属于分裂异常。如果是单核1PN，会继续培养，如果是三核3PN，属于异常受精卵，则培养终止。单核受精卵依然有3%的概率可正常发育为囊胚。